Comment faire un étalonnage ?

La réalisation d’un étalonnage fait appel à une succession d’étapes :
1- Choisir la gamme de concentrations à couvrir pour le composé à doser, et les points de gamme à faire
2- Calculer les dilutions et volumes à prélever pour disposer de ces points de gamme, connaissant la concentration de la solution mère du composé à doser qui est à disposition (et s’assurer que l’on dispose d’un volume suffisant de solution mère pour réaliser la gamme d’étalonnage)
3- Réaliser les prélèvements de la solution mère et les dilutions, pour obtenir les différents points de gamme ; bien agiter les différentes solutions étalons ainsi préparées
4- Prélever un aliquote de chaque solution afin d’analyser les différents points de gamme avec l’appareil de mesure (ex : spectrophotomètre UV, après avoir placé un aliquote de chaque solution étalon dans une cuve adaptée)
5- Reporter les résultats de mesure pour chaque point de gamme, afin de tracer la droite d‘étalonnage
6- Analyser avec le même appareil de mesure (et le même jour) les échantillons inconnus, afin de quantifier le composé à doser dans ces échantillons grâce à la droite d’étalonnage
Pictogramme attention
Se placer dans le domaine de linéarité de l’appareil de mesure
Pictogramme attention
Poser les calculs pour ne pas se tromper !!
Il existe trois types d’étalonnage :
Étalonnage externe : les solutions étalons contiennent uniquement le/les composé(s) à doser - pour chaque composé, on a des solutions étalons avec une concentration donnée croissante en composé
Etalonnage interne : les solutions étalons contiennent les composés à doser, à des concentrations croissantes, ainsi qu’un étalon interne rajouté à la même concentration dans tous les points de gamme (et dans les échantillon à doser aussi)
Ajouts dosés : le composé à doser est utilisé comme étalon – l’échantillon est d’abord analysé, puis une concentration connue du composé est ajoutée et l’analyse refaite, et ainsi de suite jusqu’à faire plusieurs ajouts successifs dans le même échantillon
Pictogramme information
Les composés à doser peuvent être à des concentrations différentes dans chaque étalon
Pictogramme attention
L’étalon interne doit être de structure et concentration proches des composés à doser
Pictogramme attention
La concentration de chaque ajout doit être assez proche de la concentration à mesurer dans l’échantillon
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