Facteurs influençant le pipetage
Les facteurs influençant le pipetage sont nombreux et concernent le dispositif de prélèvement (couple pipette/pointe), l’environnement et l’échantillon, et l’expérimentateur.
Pipette/pointe
- pipette non/mal calibrée
- pointe non adaptée
- pointe abimée
- usure des joints
- pipette endommagée (vapeurs de liquide corrosif, liquide aspiré, …)
Environnement
- température ambiante
- humidité relative
- altitude
Echantillon
- température
- densité
- viscosité
- volatilité
Déposez les images correspondant à un pipetage correct dans le cadre
Une immersion trop profonde de la pointe cause une compression du coussin d’air conduisant à une aspiration de liquide supérieure à la consigne. Elle augmente aussi le risque d’avoir des gouttelettes accrochées à l’extérieur de la pointe qui peuvent être transférées et fausser le volume délivré.
L’angle d’immersion doit être aussi proche que possible de la verticale (entre 0 et 20°). Plus on s’éloigne de la verticale et plus le niveau de liquide sera inférieur à celui demandé.
Les mouvements brusques lors de l’enfoncement ou du relâchement du piston sont à proscrire. Une aspiration non contrôlée peut créer des bulles, des aérosols et une contamination de la pipette.
Une distribution en appuyant l’extrémité de la pointe contre la paroi du récipient réduit ou élimine la quantité d’échantillon résiduelle.
Pour les transferts d’un volume de l’ordre du µL, effleurer la surface du liquide attire la goutte hors de la pointe, ce qui assure une meilleure distribution.
Pour en savoir plus
cliquez l’ampoule
Quelques conseils supplémentaires
- Eviter les variations thermiques
- Les micropipettes à coussin d’air sont sensibles à la différence de température entre l’air du coussin et celle du liquide à prélever. Les liquides froids ont tendance à présenter une distribution excédentaire, tandis que les liquides chauds peuvent être distribués en quantité inférieure. Si l’échantillon le permet, prévoyez suffisamment de temps pour atteindre l’équilibre thermique. Sinon, préférez une micropipette à déplacement positif (cf. limites d’utilisation)
- Pré-rincer les cônes
- Après avoir chargé la pointe sur la pipette, aspirez et distribuez au moins deux fois, ce qui limite l’évaporation à l’extrémité de la pointe. Cela est particulièrement nécessaire pour des volumes de l’ordre du µL.
- Pipette précise et juste ?
