Dosage d’un échantillon

Introduire 2 mL d’échantillon (dans certains cas il peut être nécessaire de diluer) dans un tube à essai de 25 mL.
Ajouter 2,5 mL de réactif sulfomolybdique. Agiter énergiquement.
Ajouter ensuite 15,5 mL d’acide ascorbique. Agiter à nouveau.
Recouvrir le tube à essai d’un bout de parafilm.
Placer le tube à essai (dans un portoir) dans un bain-marie (réglé à 85°C) pendant 10 min.
Refroidir ensuite le tube à essai sous un courant d’eau froide ou dans un bain d’eau froide.
Prélever un aliquote, le placer dans un cuve spectro jetable, et procéder ensuite à la mesure spectrométrique à 830 nm.

Essai à blanc

Effectuer un essai à blanc dans les mêmes conditions que le dosage d’un échantillon, en remplaçant l’échantillon par de l'eau distillée.

Etalonnage

Dans une série de tubes à essai de 25 mL, procéder comme pour l’échantillon, en introduisant au départ 2 mL d’une solution étalon d’orthophosphates. Réaliser un étalonnage avec par exemple 6 solutions : 0 ; 2 ; 4 ; 6 ; 8 ; 10 mg.L^-1 de P

Astuce pratique : préparer en même temps l’échantillon, l’essai à blanc et les étalons, afin de gagner du temps ensuite lors de l’attente au bain-marie.

 ≈ 20 minutes / échantillon